Molecular detection of anaplasmataceae agents on dogs from the departament of Piura, Peru

This study aimed to study the prevalence of Anaplasmataceae organisms through the nested-PCR and phylogenetic analysis on domestic dogs in the Department of Piura, Peru. Two hundred and twelve canine blood samples were randomly collected on dogs from the central urban areas at the Piura Department in Peru. The extracted DNAs were tested, by nested-PCR based on 16SrRNA gene, to identify agents from Anaplasmataceae family. These results show that there was a prevalence of 18.5% (40/216) of positive dogs, 13.8% (30/216) for Ehrlichia canis, 7.4% (16/216) for Anaplasma platys and 0.1% (2/216) for Ehrlichia sp. confirmed by sequencing analysis. Co-positivity among Anaplasmataceae family species was present in 25% (10/40) of positive samples. There was a significant association among Anaplasmataceae family infection in dogs and the following variables: sex (p=0.034), presence of ticks (p=0.0001), and socio-economic status (p=0.001). There was no statistical association on the variables "living with other animals" and "age group" (p=0.1074). The partial sequences on the portion of the 16S rRNA gene, from positive samples for agents of Anaplasmataceae family demonstrated an identity of 97-100% with the isolated E. canis and A. platys obtained from the GenBank. This is the first study on infection by agents of Anaplasmataceae family in dogs in the Department of Piura, through molecular analysis

Spotted fever group rickettsial infection in dogs and their ticks from domestic-wildlife interface areas in southeastern Brazil / Infecção por rickettsias do Grupo da Febre Maculosa em cães e carrapatos de áreas de interface doméstico-silvestre no sudeste Brasileiro

Abstract Rickettsia rickettsii is the causative agent of Brazilian spotted fever (BSF), for which humans and dogs are both susceptible. Dogs are sentinels in serological surveys, however, canine disease is rarely reported. Therefore, we aimed to evaluate natural infection by spotted fever group (SFG) Rickettsia spp. in dogs and ticks collected from domiciles close to forest fragments, featuring domestic-wildlife interface areas. Samples from 115 dogs and 135 ixodids were assessed by polymerase chain reactions (PCR) targeting the gltA gene for Rickettsia spp. and the ompA gene for the SFG rickettsial species. One dog (0.87%; 1/115) was positive for R. rickettsii. This dog presented nonspecific laboratory and clinical abnormalities (thrombocytopenia, hyperproteinemia, lymph node enlargement, emaciation, anorexia, and lethargy). Rickettsia parkeri was identified in 2.96% (4/135) of the ticks (Amblyomma sculptum, A. aureolatum, and Rhipicephalus sanguineus). This study confirmed the presence of SFG bacteria in non-endemic and preserved locations, where domestic and wild populations interact. We reinforce the fact that the dog is susceptible to natural R. rickettsii infection. Although this is a rare finding, preventive measures should be taken against BSF in the studied areas. Finally, R. parkeri infection is possibly being demonstrated in A. sculptum for the first time.

Resumo Rickettsia rickettsii é o agente causador da Febre Maculosa Brasileira (FMB), doença na qual humanos e cães são susceptíveis. Os cães são sentinelas nos inquéritos sorológicos, contudo, a doença canina é raramente descrita. Assim sendo, objetivou-se avaliar a infecção natural por Rickettsia spp. do Grupo da Febre Maculosa (GFM) em cães e carrapatos obtidos de domicílios próximos a fragmentos de mata, caracterizando áreas de interface doméstico-silvestre. Amostras de 115 cães e 135 ixodídeos foram avaliadas pela reação em cadeia da polimerase (PCR) tendo como alvo o gene gltA de Rickettsia spp. e o gene ompA das espécies do GFM. Um cão (0,87%; 1/115) foi positivo para R. rickettsii. Este animal apresentou alterações clínicas e laboratoriais inespecíficas (trombocitopenia, hiperproteinemia, linfonodos edemaciados, emagrecimento, anorexia e letargia). Rickettsia parkeri foi identificada em 2,96% (4/135) dos carrapatos (Amblyomma sculptum, A. aureolatum e Rhipicephalus sanguineus). Este estudo confirmou a presença de bactérias do GFM em locais preservados e não endêmicos, onde populações domésticas e silvestres interagem. Reforçamos o fato do cão ser susceptível à infecção natural por R. rickettsii. Embora este seja um achado raro, medidas preventivas devem ser tomadas contra a FMB nas áreas estudadas. Em última análise, a infecção por R. parkeri possivelmente está sendo demonstrada pela primeira vez em A. sculptum.

Linfocitose extrema associada à leucemia linfoblástica aguda (LLA) de células T em um cão jovem: relato de caso / Extreme lymphocytosis associated with acute T-cell lymphoblastic leukemia(ALL) in a young dog: case report

A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma enfermidade de origem linfóide e consiste na proliferação de células neoplásicas na medula óssea. O objetivo desse trabalho é relatar o caso de um cão macho, sem raça definida, de apenas um ano de idade, atendido no Hospital Universitário de Medicina Veterinária Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) da Universidade Federal Fluminense (UFF) com queixa principal de inapetência e diarreia há três dias e que foi diagnosticado com essa neoplasia por meio da sintomatologia clínica, resultados do hemograma e do mielograma. O paciente apresentava valores exacerbados de linfócitos (553.094 células/µL), além de anemia, trombocitopenia, hipoalbuminemia e elevação da atividade das enzimas fosfatase alcalina e ALT. Foram observadas manchas de Gümprecht, linfócitos atípicos apresentando anisocitose, anisocariose, intensa basofilia citoplasmática e monócitos ativados. O mielograma apresentou também um aumento de linfócitos e contagem de linfoblastos superior a 30% na medula, confirmando o diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda. Ademais, posteriormente, foi realizado exame de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) para rearranjos de receptores de antígenos e foi detectado clonalidade para linfócitos T. O animal foi submetido à quimioterapia (protocolo com ciclofosfamida, vincristina e prednisona), mas não resistiu à gravidade do quadro, vindo a óbito após a primeira sessão, pouco tempo após o diagnóstico.

Acute lymphoblastic leukemia (LLA) is a disease with a lymphoid origin and consists of the proliferation of neoplastic cells in the bone marrow. The aim of this study was to report the case of only one year old mixed breed male dog, attended at the University Hospital of Veterinary Medicine Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) from Universidade Federal Fluminense (UFF), with major complaint of inappetence and diarrhea three days ago and which was diagnosed with this neoplasm through clinical symptoms, complete blood count and myelogram results. The patient had increased values of lymphocytes (553,094 cells/μL), in addition to anemia, thrombocytopenia, hypoalbuminemia and elevated alkaline phosphatase and ALT activities. Gümprecht shadows, atypical lymphocytes presenting anisocytosis, anisocariosis, and severe cytoplasmic basophilia and activated monocytes were observed. Myelogram also showed an increase in lymphocytes and a lymphoblastic count greater than 30% in the marrow, confirming the diagnosis of LLA. In addition, polymerase chain reaction (PCR) for antigen receptor rearrangements was performed and clonality for T lymphocytes was detected. The animal underwent chemotherapy (protocol with cyclophosphamide, vincristine and prednisone), but did not withstand the severity of the disease, coming to death after the first session, shortly after diagnosis.

Linfocitose extrema associada à leucemia linfoblástica aguda (LLA) de células T em um cão jovem: relato de caso / Extreme lymphocytosis associated with acute T-cell lymphoblastic leukemia (ALL) in a young dog: case report

A leucemia linfoblástica aguda (LLA) é uma enfermidade de origem linfóide e consiste na proliferação de células neoplásicas na medula óssea. O objetivo desse trabalho é relatar o caso de um cão macho, sem raça definida, de apenas um ano de idade, atendido no Hospital Universitário de Medicina Veterinária Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) da Universidade Federal Fluminense (UFF) com queixa principal de inapetência e diarreia há três dias e que foi diagnosticado com essa neoplasia por meio da sintomatologia clínica, resultados do hemograma e do mielograma. O paciente apresentava valores exacerbados de linfócitos (553.094 células/µL), além de anemia, trombocitopenia, hipoalbuminemia e elevação da atividade das enzimas fosfatase alcalina e ALT. Foram observadas manchas de Gümprecht, linfócitos atípicos apresentando anisocitose, anisocariose, intensa basofilia citoplasmática e monócitos ativados. O mielograma apresentou também um aumento de linfócitos e contagem de linfoblastos superior a 30% na medula, confirmando o diagnóstico de leucemia linfoblástica aguda. Ademais, posteriormente, foi realizado exame de Reação em Cadeia de Polimerase (PCR) para rearranjos de receptores de antígenos e foi detectado clonalidade para linfócitos T. O animal foi submetido à quimioterapia (protocolo com ciclofosfamida, vincristina e prednisona) mas não resistiu à gravidade do quadro, vindo a óbito após a primeira sessão, pouco tempo após o diagnóstico.

Acute lymphoblastic leukemia (LLA) is a disease with a lymphoid origin and consists of the proliferation of neoplastic cells in the bone marrow. The aim of this study was to report the case of only one year old mixed breed male dog, attended at the University Hospital of Veterinary Medicine Prof. Firmino Mársico Filho (HUVET) from Universidade Federal Fluminense (UFF), with major complaint of inappetence and diarrhea three days ago and which was diagnosed with this neoplasm through clinical symptoms, complete blood count and myelogram results. The patient had increased values of lymphocytes (553,094 cells/µL), in addition to anemia, thrombocytopenia, hypoalbuminemia and elevated alkaline phosphatase and ALT activities. Gümprecht shadows, atypical lymphocytes presenting anisocytosis, anisocariosis, and severe cytoplasmic basophilia and activated monocytes were observed. Myelogram also showed an increase in lymphocytes and a lymphoblastic count greater than 30% in the marrow, confirming the diagnosis of LLA. In addition, polymerase chain reaction (PCR) for antigen receptor rearrangements was performed and clonality for T lymphocytes was detected. The animal underwent chemotherapy (protocol with cyclophosphamide, vincristine and prednisone), but did not withstand the severity of the disease, coming to death after the first session, shorly after diagnosis.

Circulation of spotted fever group rickettsiae among dogs seropositive for Leishmania spp. in an urban area of Brazil

Abstract INTRODUCTION: Dogs play an epidemiological role in several vector-borne diseases that affect human and animal health worldwide. We aimed to identify rickettsial circulation among dogs with canine visceral leishmaniasis (CVL) from a region endemic for both diseases. METHODS: CVL-seropositive dogs were screened for spotted fever group rickettsiae using an indirect immunofluorescence assay. RESULTS: Among the CVL-positive dogs, anti-Rickettsia rickettsii antibodies were identified in one asymptomatic and one oligosymptomatic dog. CONCLUSIONS: This study shows low circulation of antibodies to R. rickettsii in CVL-seropositive dogs. It is recommended that surveillance studies in dogs should continue in order to monitor this scenario.

Behavior of red cell distribution width (RDW) in a population of anemic and non-anemic dogs from an ambulatory care unit

O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento do índice de anisocitose na interpretação do hemograma de cães anêmicos e não anêmicos. Atualmente, contadores hematológicos automatizados veterinários fornecem alguns índices que não são calculados quando o hemograma é confeccionado manualmente. A saber: RDW-CV (Amplitude de distribuição de hemácias como coeficiente de variação) e RDW-SD (Amplitude de distribuição de hemácias como desvio-padrão). Tais índices levaram a uma nova abordagem do paciente com anemia permitindo que a anisocitose fosse mensurada de uma forma quantitativa. Foram avaliados 454 hemogramas processados no período de setembro de 2009 a março de 2011. Foram calculados média e desvio padrão e uma análise de variância foi realizada. Os cães anêmicos (125/454) apresentaram altos valores de RDW enquanto que, em animais não anêmicos, esse índice permaneceu dentro dos valores de normalidade previamente estabelecidos. O índice também estava alto em animais com anisocitose observada à microscopia. Houve uma diferença significante entre os índices dos animais que apresentaram Volume Globular Médio (VGM) elevado e normal. Concluiu-se que os índices RDW-CV e RDW-SD foram sensíveis a pequenas variações no tamanho das hemácias e na heterogeneidade, sendo mais precisos que a observação microscópica para se detectar anisocitose e mais sensível que VGM para variação eritrocitária.

The aim of this study was to evaluate the behavior of the red cell distribution width (RDW) in the interpretation of the Complete Blood Count (CBC) from anemic and non-anemic dogs. Currently, automated veterinary blood cell analyzers provide hematologic indices not calculated in manually performed CBC, such as Red Blood Cell Distribution Width measured by Variation Coefficients (RDW-CV) and Red Blood Cell Distribution Width measured by Standard Deviation (RDW-SD), which has led to new of September 2009 to March 2011. Mean and standard deviation were calculated and variance analysis was performed. Anemic dogs (125/454) presented higher values for RDW indices. In non-anemic animals, these indices were in accordance with the normal values previously established. Both indices were higher in dogs with microscopic observation of anisocytosis. There was a significant difference among índices of the animals which showed normal and increased Mean Corpuscular Volume (MCV). We concluded that RDW-CV and RDW-SD indices were sensitive to small variations on erythrocyte size and heterogeneity, being more accurate than microscopic observations to detect anisocytosis and more sensitive than MCV to erythrocyte variation.